Diagnose af kronisk granulomatøs sygdom

Diagnostik

Diagnosen af kronisk granulomatøs sygdom er baseret på vurdering af fagocytternes funktionelle aktivitet. Følgende tests anvendes:

1. Nitroblue tetrazolium reduktionstest (NBT-test). Normalt, når fagocytter absorberer det gule farvestof nitroblue tetrazolium (NBT), øges deres metaboliske aktivitet, mens NBT oxideres, og produkterne fra denne reaktion farves blå. Hvis fagocytternes metabolisme forstyrres, falder intensiteten af den blå farvning.
2. Neutrofil kemiluminescens. Substratoxidation ledsages af ultraviolet lysudsendelse eller fluorescens, og emissionens intensitet kan bruges til at bedømme fagocytternes funktionelle aktivitet.
3. Vurdering af fagocytisk aktivitet: fagocytters evne til at ødelægge katalase-positive bakterier in vitro.
4. Genetisk undersøgelse af patienter og deres familier ved påvisning af forstyrrelser i fagocytternes funktionelle aktivitet.

Definition af typer og undertyper af kronisk granulomatøs sygdom

Immunoblotting med antistoffer mod alle fire komponenter af NADPH-oxidase anvendes almindeligvis til at differentiere mellem typer og undertyper af kronisk granulomatøs sygdom. Hvis en af de cytosoliske komponenter (p47 ^phax eller p67 ^phax ) er fraværende i blottet, indikerer dette en mutation i det tilsvarende gen, hvorimod hvis en af membrankomponenterne (gр91 ^phax eller p22 ^phax ) er fraværende, detekteres den anden heller ikke, da underenhederne stabiliserer hinanden for fuld modning og ekspression. Nogle forskere bruger cytoflowmetri med anti-cytokrom p558-antistoffer til at detektere gp91 ^phax /p22 ^phax på overfladen af neutrofiler. I sidste ende bekræftes diagnosen ved at identificere en mutation i det tilsvarende gen.

Prænatal diagnose af kronisk granulomatøs sygdom

Før molekylærgenetiske teknologier blev tilgængelige, blev prænatal diagnose af kronisk granulomatøs sygdom udført ved at måle NADPH-oxidaseaktiviteten i føtale neutrofiler og ved at indsamle navlestrengsblod ved hjælp af fetoskopi i 16-18 uger af graviditeten. DNA-analyse af fostervandsceller eller chorionvilli udføres nu for at lede efter specifikke gendefekter ved hjælp af Southern blotting, polymerasekædereaktion og restriktionsfragmentlængdepolymorfi, hvilket er mere pålideligt og muliggør diagnose tidligere i graviditeten.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]